订阅包涵体的溶解操作过程
来源：网络收集 点击： 时间：2024-04-09【导读】：
最近小编收到很多问题，其中一个就是下面小编为大家整理一下关于包涵体的溶解操作过程的步骤，希望这些方法能够帮助到大家。方法/步骤1/6分步阅读
2/6
3/6
4/6
5/6
6/6
注意事项
首先，去保存于-80摄氏度的含原核表达质粒的表达工程菌BL21（DE3）100微升分别加入10ml加Kan的培养液中，在37摄氏度250r/min下振荡培养过夜。
2/6然后，加入1%量接种至1L的BL培养基中，在37摄氏度振荡培养至OD600为0.5-0.6大约为3-4小时。
3/6然后，加入IPTG，在37摄氏度200r/min下振荡培养4-6小时，用12000g离心菌体，用60ml冰冷的STE悬浮，离心够菌体保存-20摄氏度下冰箱中备用。
4/6然后，菌体用60ml的冰冷的STE悬浮,用种终质量浓度为100微克每毫升的溶菌酶，在冰浴条件下处理十五分钟，然后添加终质量为5mmol/L的DTT。
5/6然后，将样品分成六份10ml平行样，分别添加终质量浓度为0、0.25%、0.5%、1%、2%以及4%的肌氨酰，然后进行超声波破碎。
6/6最后，样品10000g离心二十五分钟，回收上清液，沉淀用STE悬浮，进行SDS-PAGE分析，选择包含体最大溶解性的最低的肌氨酰质量浓度。
注意事项上述方法为小编整理所得，希望能够帮助到大家。
智能仪器实验版权声明：
1、本文系转载，版权归原作者所有，旨在传递信息，不代表看本站的观点和立场。
2、本站仅提供信息发布平台，不承担相关法律责任。
3、若侵犯您的版权或隐私，请联系本站管理员删除。
4、文章链接：http://www.1haoku.cn/art_477585.html
上一篇：珊瑚玉为什么老料的不透
下一篇：老瓷器的棕眼鉴定方法
