赶走气泡，压平分离胶，一般用去离子水，有时为防止与胶相容会使用有机试剂。

样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的，因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合，以便于SDS-PAGE的进行。但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好。对于非还原Loading buffer（即不含巯基乙醇）的样品，一般是不要煮沸的。

正负离焦特点：

实验表明，激光加热50~200μs材料开始熔化，形成液相金属并出现汽化，形成反冲压力，并以极高的速度喷射，发出耀眼的白光。与此同时，高浓度气体使液相金属运动至熔池边缘，在熔池中心形成凹陷。

当负离焦时，材料内部功率密度比表面还高，易形成更强的熔化、汽化，使光能向材料更深处传递。所以在实际应用中，当要求熔深较大时，采用负离焦；焊接薄材料时，宜用正离焦。

当离焦较小时，就会产生较高的功率密度，在微秒时间范围内，表层即可加热至沸点，产生大量汽化。因此，高功率密度对于材料去除加工，如打孔、切割、雕刻有利。