叶绿体色素的提取与分离方法
来源:网络收集 点击: 时间:2024-05-09称取新鲜去大叶脉的菠菜叶片,或芹菜、油菜等其他植物的新鲜绿叶5 g,剪碎放人研钵中,加入乙醇5 ml、少许CaCO3,中和细胞中的酸防止Mg, 从叶绿素中心释放,和石英砂,研磨成勻浆,再加入适量的乙醇20~25 ml,然后用漏斗过滤,即得叶绿体色素液。

若用千粉时,则称取1g 干粉放人小烧杯中,加95%乙醇20~30 ml 提取,并随时搅动。待乙醇呈深绿色时,滤出浸提液备用。取准备好的滤纸条(2cmX20cm),将其一端剪去两侧,中间留一个长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条。

用毛细管吸取叶绿体色素提取液点于滤纸的下端窄条的上方中央,注意一次所点溶液不可过多,如色素过淡,用电吹风吹千后再重复1~2 次。

在大试管中加入汽油5~10ml,或其他层析液,如石油醚:丙酮苯体积比为20 :2 :1的混合溶液,然后将滤纸条上端固定在软术塞上,插人试管内,使窄条进入溶液中,色素点要略高于液面,滤纸条边缘不可碰到试管壁,盖紧软木塞,直立于阴暗处,或试管外套一黑纸套。

经0.5~1h后,观察分离后色素带的分布。最上端橙黄色的是胡萝卜素,其次为叶黄素,再下面蓝绿色为Chl a,最后的黄绿色为Chl b。

取叶绿体色素提取液少许于1支试管中,用反射光和透射光观察提取液的颜色有何不同,反射光下观察到的提取液颜色即为叶绿素产生的荧光颜色。取叶绿体色素提取液少许,分装于两支试管,光对叶绿素的破坏作用中,一支放在黑暗处(或用黑纸套包裹),另一支放在强光下(阳光下),经过2~3h后,观察两支试管中溶液的颜色有何不同。

上述方法为小编整理所得,希望能够帮助到大家。
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